荧光光度计的光路有何特点
荧光光度计的光路设计与其他光谱仪有所不同,主要体现在其独特的光源、探测方式以及样品的激发与发射光的分离。下面是荧光光度计光路的主要特点:1. 激发光与发射光的分离荧光光度计的核心特点之一是激发光与发射光的分离。这是因为荧光光度计的工作原理是通过激发光源激发样品发出荧光,荧光光度计需要测量发射光的强度。在设计光路时,为了避免激发光与发射光混杂,通常采用以下措施:
[*]激发光滤光片:通过滤光片选择特定波长的激发光,确保激发光的波长适合样品的荧光激发范围。
[*]发射光滤光片:使用另一个滤光片或光学元件来选择发射光的波长,排除掉残留的激发光。
2. 单色光源与选择性激发荧光光度计的激发光源通常是高压氙灯、汞灯或激光,这些光源能够产生宽谱的光线,然后通过单色器(如光栅、棱镜等)将其分解为不同波长的单色光。根据待测样品的激发波长,选择合适的单色光照射样品。
3. 光路的光学元件荧光光度计的光路通常包括以下几个光学元件:
[*]激发光源:如氙灯、汞灯或激光等,提供激发所需的光线。
[*]激发光滤光片或单色器:选择适合样品的激发光波长。
[*]样品池:激发光照射到样品上,激发样品中的荧光分子。
[*]发射光滤光片或单色器:选取发射光的波长并排除激发光。
[*]光电探测器(如光电二极管或光电倍增管):检测通过样品后的发射光,测量其强度。
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