流式细胞仪运行时出现堵塞,该如何处理?
流式细胞仪运行时出现堵塞是常见问题,可能导致数据异常或仪器损坏。以下是系统的处理步骤和预防措施:一、立即处理步骤
暂停实验
立即停止进样,关闭样本流,避免堵塞加重。
检查堵塞位置
喷嘴(Nozzle):观察流动室是否可见颗粒物或纤维。
样本管/鞘液管:检查管路是否有气泡或异物。
冲洗系统
使用去离子水或鞘液冲洗管路:
启动仪器的“快速冲洗”或“高流速冲洗”模式。
手动冲洗:拆下样本管,用注射器吸取去离子水反复冲洗喷嘴(注意压力不可过大)。
清除物理堵塞
若冲洗无效,尝试以下方法:
超声清洗:将喷嘴浸泡在去离子水中,超声处理5-10分钟。
细针疏通:用专用通针(如厂家提供的清洁针)轻柔疏通喷嘴(避免划伤内壁)。
化学清洗:用70%乙醇或1%次氯酸钠浸泡喷嘴10分钟,再冲洗干净。
二、常见堵塞原因及针对性处理
原因1:细胞团块或大颗粒
解决方案:
-样本过滤:使用30-40μm滤网过滤后重新上样。
-避免高浓度细胞(推荐稀释至1×10⁶/mL以下)。
原因2:纤维或灰尘污染
解决方案:
-清洁实验台环境,确保样本管无棉絮或灰尘。
-定期更换鞘液过滤器。
原因3:结晶或盐沉积
解决方案:
-用去离子水彻底冲洗管路,避免缓冲液残留。
-使用含EDTA的缓冲液防止钙盐沉积。
原因4:喷嘴内部污染
解决方案:
-拆下喷嘴,用软毛刷(如牙刷)轻轻刷洗内壁。
-避免使用金属工具以免刮伤。
非常欣赏您的观点,很有见地。 感谢大家的耐心解答。
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