舒耐科技 发表于 前天 15:07

测dna浓度的仪器叫什么

测量DNA浓度的仪器主要有以下几种:
紫外分光光度计
原理:基于朗伯-比尔定律,利用DNA在260nm处(紫外线波长)有最大吸收峰的特性,通过测定样品在260nm处的吸光值来计算DNA浓度。同时,还会测定280nm处的吸光值,用于评估DNA的纯度。因为蛋白质等杂质在280nm处也有吸收峰,通过A260/A280比值可以判断DNA是否受到蛋白质污染。一般来说,纯净的DNA样品,A260/A280比值应为1.8左右;若比值小于1.8,说明样品可能含有较多蛋白质;若大于2.0,则可能存在RNA污染或提取过程中使用了某些试剂残留。
特点:操作简单、快速,不需要复杂的样品预处理,能够直接测定DNA溶液的浓度和纯度。但是其灵敏度相对较低,对于低浓度的DNA样本测量不够准确,且不能区分DNA和其他在260nm处有吸收的物质,如RNA、游离核苷酸等。
应用场景:适用于初步筛选和大量样本的快速检测,常用于基因克隆、PCR反应体系配制前对模板DNA的定量,以及质粒DNA提取后的浓度测定等。
NanoDrop(超微量分光光度计)
原理:与普通紫外分光光度计类似,也是利用DNA在特定波长下的紫外吸收特性来测定浓度。但它采用了更先进的光学系统和检测技术,能够在仅需1-2微升样品的情况下,快速准确地测量DNA浓度。
特点:具有高灵敏度、操作简便、测量速度快等优点。它可以直接显示测量结果,无需复杂的计算,并且可以同时测量多个样品,提高了工作效率。不过,其测量结果可能会受到样品中的杂质、气泡、温度等因素的影响,需要在使用前对仪器进行校准和清洁,以确保测量的准确性。
应用场景:广泛应用于分子生物学实验室的日常研究工作,如PCR产物的定量、酶切产物的回收定量、核酸标记效率的测定等,尤其适合对珍贵或少量样本的精确定量。
Qubit荧光计
原理:基于荧光染料法,使用特定的荧光染料(如Qubit试剂盒中的染料)与DNA结合后,在特定激发光的照射下会发出荧光,荧光强度与DNA的量成正比。通过制作标准曲线(将已知浓度的DNA标准品与荧光染料混合,测量其荧光强度,绘制出以DNA浓度为横坐标,荧光强度为纵坐标的标准曲线),再测量待测DNA样品与相同荧光染料混合后的荧光强度,根据标准曲线计算出待测DNA的浓度。
特点:特异性强,能够精准地区分DNA与其他杂质,只对DNA进行定量,不受蛋白质、RNA等的干扰。灵敏度高,可检测到pg级别的DNA,对于低浓度的DNA样本也能准确测量。但是其操作相对复杂一些,需要使用配套的试剂盒和仪器,成本也相对较高。
应用场景:常用于对DNA样本质量要求较高的实验,如下一代测序(NGS)文库构建前的DNA质量控制、基因表达定量分析等,能够更准确地反映DNA样本的真实浓度和质量。

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