mn8875 发表于 2024-8-8 13:23:24

色谱柱的分类与选择

色谱柱的分类可以从多个维度进行,主要包括以下几个方面:
1、按柱管材质和粗细分类:
填充色谱柱:这类色谱柱多用内径46mm的不锈钢管制成螺旋形柱管,常用柱长24m。它们填充有液体固定相(气-液色谱)或固体固定相(气-固色谱)。
毛细管色谱柱:毛细管色谱柱的柱管为毛细管,常用内径0.1~0.5mm的玻璃或弹性石英毛细管,柱长可达几十米至百米。毛细管色谱柱按填充方式可分为开管毛细柱及填充毛细柱。
2、按分离机制分类:
分配柱:利用固定液(高沸点液体)涂渍在载体上构成的液体固定相,通过组分的分配系数差别实现分离。化学键合相是其中的一种特殊形式,具有不流失的优点。
吸附柱:将吸附剂装入色谱柱构成,利用组分的吸附系数差别进行分离。固体固定相还包括分子筛与高分子多孔小球等。
3、按色谱类型分类:
液相色谱柱:将样品带载液体注入柱内,利用溶液对样品中各化合物成分的亲和力差别进行分离。液相色谱柱按分离模式可分为正相、反相、离子交换等色谱柱。
气相色谱柱:将样品带载气体注入柱内,利用气体与目标化合物在柱内的相互作用原理进行分离。
4、按用途分类:
常规分析柱:适用于一般分析需求。
窄径柱:内径较小,灵敏度较高,适用于需要高灵敏度的分析。
毛细管柱:具有极高的分离能力,常用于复杂混合物的分析。
制备柱:包括半制备柱、实验室制备柱和生产制备柱,用于样品的制备和纯化。
色谱柱的选择:
1、分析物的性质:
分子量:大分子样品一般应选择较大孔径的色谱柱,如蛋白质、多肽类。
极性:非极性和极性较弱的化合物常选择直链烷烃(如C18)固定相色谱柱;极性较强的化合物则可能需要选择如CN柱或氨基柱等。
官能团:特定官能团的存在可能影响色谱柱的选择,如含苯环的芳香族化合物在苯基柱上具有较高的选择性。
2、色谱柱的尺寸:
柱长:较长的色谱柱组分保留较强,运行时间较长,柱效更高,分离度效果更好。但应综合衡量运行时间和柱效,选择长度适宜的色谱柱。
内径:内径小的色谱柱灵敏度较高,峰型更窄,但载样量较小。应根据实际需求在灵敏度和载样量之间综合衡量。
填料粒径:粒径小的色谱柱分离度较好,但色谱柱压力更大。应根据分离需求选择合适的粒径。
3、色谱柱的填料:
材质:不同材质的填料具有不同的物理化学性质,如硅胶、氧化铝、聚合物等。
孔径:大孔径的填料可以延长大分子在填料中的滞留时间,达到充分分离。
比表面积:高比表面积具有较强的保留能力、柱容量和分离度,但达到平衡状态的时间较长。
4、流动相的组成:
流动相的溶剂、添加剂和pH值等都会影响色谱柱的分离效果。应根据分析物的性质选择合适的流动相。
5、色谱柱的使用温度和压力:
柱温和流速等条件也会影响色谱柱的分离效果。应根据实验条件进行优化。

sf3557 发表于 2024-8-9 09:05:27

感谢分享

勤劳的蚂蚁 发表于 2024-8-26 13:23:46

嗯嗯,学到了,以后试试这个方法。

justdoit 发表于 2024-8-26 13:33:27

还有超临界流体色谱柱(SFC),使用超临界流体作为流动相,适用于难以用传统色谱分离的物质。
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