浅谈 凝胶过滤色谱的分离原理
凝胶过滤色谱（GelFiltrationChromatography），也称为凝胶渗透色谱（GelPermeationChromatography），是一种根据分子大小进行分离的色谱技术。它的原理基于多孔凝胶珠（或称为凝胶珠）的物理筛选作用。以下是凝胶过滤色谱的分离原理：1.孔隙大小：凝胶珠具有一定大小的孔隙，这些孔隙允许小分子物质进入，而大分子物质则被排除在孔隙之外。
2.分子筛分：当样品混合物通过凝胶柱时，小分子物质能够进入凝胶珠的孔隙中，因此它们在柱中的路径更长，移动速度更慢。而大分子物质则不能进入孔隙，只能沿着凝胶珠的外部流动，因此它们的路径更短，移动速度更快。
3.分离效果：由于不同大小的分子在凝胶柱中的移动速度不同，它们会按照分子大小顺序被分离。大分子首先被洗脱，随后是中等大小的分子，最后是小分子。
4.流速控制：凝胶过滤色谱的流速通常由溶剂的流速控制，而不是由压力控制。因此，它是一种温和的分离技术，适合于生物大分子如蛋白质、多糖等的分离。
5.选择凝胶：凝胶珠的孔隙大小和凝胶的交联度决定了凝胶柱的选择性。选择合适的凝胶对于实现有效的分离至关重要。
6.应用：凝胶过滤色谱广泛应用于蛋白质、多肽、核酸、病毒等生物大分子的纯化和分析，也用于去除样品中的小分子杂质，如缓冲液成分、盐类等。
凝胶过滤色谱是一种非变性、非破坏性的分离技术，不会改变分子的活性，因此特别适用于生物分子的分离和纯化。
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