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酶标仪光程校正

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发表于 4 天前 | 显示全部楼层 |阅读模式
‌酶标仪光程校正的步骤如下‌:
样品调零‌:在进行任何实验之前,需要进行样品调零。具体操作是将酶标仪的光路中安装一个空载基线垫,这个垫可以是纯水或50 mM Tris-HCl,pH 7.5左右。将垫纳入试管中,放入酶标仪读数孔,按照使用说明书进行操作,调整到读数为零。如果是单波长酶标仪,调整到零光密度;如果是多波长仪器,调整到零光线强度‌。
空白校正‌:空白校正是用于消除任何背景噪声或杂质的过程。具体操作是将纯溶液放入读数孔中,设置为样品,让酶标仪读取其光密度。或者加入特定酶切分子,如BCA或Lowry的试剂,以消除背景噪音‌。
标准曲线绘制‌:标准曲线实验是酶标仪定量分析的核心,用于计算样品中目标物质的浓度。制备一组由已知浓度的标准品,准备多份标准曲线,用酶标仪测量标准品的光密度。得到标准品吸光度与浓度值后,用Microsoft Excel绘制一个标准曲线,最好是一个指数式的标准曲线‌。
‌结果计算‌:测定样品的光密度后,利用标准曲线计算样品中目标物质的浓度,输出样品中每个物质的质量浓度‌。
‌酶标仪光程校正的原理和重要性‌:
酶标仪光程校正确保测量结果的准确性和可靠性。随着使用时间的增长,光源强度衰减、滤光片老化、光电探测器灵敏度变化等因素均可能影响酶标仪的测量精度。定期校准能够及时发现并纠正这些偏差,确保测量结果的准确性。此外,校准还能满足法规要求,提升实验效率,减少实验误差,节省时间和成本‌。



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