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扫描型分光光度计使用方法有哪些

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    发表于 2025-3-20 13:45:10 | 显示全部楼层 |阅读模式
      扫描型分光光度计是一种用于测量样品在不同波长下的吸光度、透射率或反射率的精密仪器,广泛应用于化学、生物、材料科学等领域。以下是扫描型分光光度计的使用方法:
      一、仪器预热
      1.连接电源:将扫描型分光光度计连接到稳定的电源上,确保电源电压与仪器要求相符。
      2.开启仪器:打开仪器电源开关,一般需要预热15 - 30分钟,使仪器内部的光源、检测器等部件达到稳定的工作状态。
      二、波长选择
      1.确定测量波长:根据样品的性质和分析目的确定所需的测量波长。可以通过查阅相关资料、标准方法或者进行预实验来确定。例如,测定蛋白质含量常用280nm波长,测定核酸含量常用260nm波长。
      2.设置波长:在仪器的操作界面上,通过波长调节旋钮或者数字输入的方式设置选定的波长。
      三、扫描型分光光度计样品准备
      1.样品溶液制备:
      ①准确称取或量取适量的样品,用合适的溶剂(如蒸馏水、缓冲溶液等)将其溶解或稀释成适当浓度的溶液。确保样品溶液中无悬浮颗粒、杂质等,以免影响测量结果。
      ②对于一些特殊样品,可能需要进行预处理,如过滤、消解等操作。
      2.选择合适的比色皿:
      ①根据样品的性质和仪器的规格选择合适的比色皿。一般有玻璃比色皿和石英比色皿两种。石英比色皿适用于紫外光区的测量,而玻璃比色皿适用于可见光区的测量。
      ②将样品溶液注入比色皿中,注意不要让溶液沾到比色皿的透光面以外的地方。比色皿的透光面要保持清洁、无划痕。
      四、测量操作
      1.放置比色皿:
      ①将装有样品溶液的比色皿放入分光光度计的样品池中,注意比色皿的放置方向要正确,一般有标记的一面要朝向仪器内部特定的方向。
      ②如果仪器有多个样品池,要确保放入正确的样品池位置,并且记录好每个样品池对应的样品编号等信息。
      2.调零:
      ①在测量样品之前,需要进行调零操作。一般使用空白溶液(如与样品溶液相同溶剂但不含样品的溶液)进行调零。
      ②将装有空白溶液的比色皿放入样品池中,然后在仪器的操作界面上选择调零功能,使仪器显示的吸光度值为0(或者透光率为100%,具体取决于仪器的显示方式)。
      3.测量吸光度或透光率:
      ①调零完成后,取出空白溶液比色皿,放入样品比色皿,然后在仪器的操作界面上选择测量吸光度或者透光率的功能。
      ②仪器会自动测量并显示出样品在选定波长下的吸光度值或者透光率值。
      五、数据记录与处理
      1.记录数据:将测量得到的吸光度或透光率数据及时记录下来,包括样品编号、测量波长、吸光度(或透光率)值等信息。
      2.数据处理:根据测量目的和相关公式对数据进行处理。例如,如果根据朗伯 - 比尔定律A=εbc(其中A为吸光度,ε为摩尔吸光系数,b为比色皿光程,c为样品浓度)来计算样品浓度,则需要知道摩尔吸光系数和比色皿光程等参数,然后通过测量的吸光度值计算出样品浓度。
      六、关机
      1.取出比色皿:测量完成后,先将比色皿从样品池中取出,用蒸馏水或者合适的溶剂清洗干净,然后晾干或者擦干比色皿,以备下次使用。
      2.关闭仪器:在仪器操作界面上选择关机功能,关闭仪器电源开关,拔掉电源插头。


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