东曹生命科学近日推出第三代Protein A亲和层析填料产品——TOYOPEARL Super A,主要用于单克隆抗体(IgG1)、IgM、鼠IgG以及Fc融合蛋白的分离纯化。TOYOPEARL Super A相较于东曹上两代Protein A填料产品,在耐碱性、洗脱pH和流速等方面均有显著提升,有助于开发高效且稳健的抗体纯化工艺方法。
TOYOPEARL Super A的产品特点:
· 新型官能团键合: 采用了经过结构改造的新型重组Protein A配基作为官能团。 · 高动态吸附载量: 柱留时间为4分钟时,对抗体的动态吸附载量可达到68 g/L。 · 更强的耐碱性能: 可使用0.5 mol/L NaOH循环清洗。 · 更温和的洗脱pH: 在更温和的酸性条件下 (pH 3.8-4.0) 即可达到95%以上的抗体回收率。 · 填料基质刚性更强: 在大型层析柱上使用高流速也能保持稳定的压力-流速曲线。
表1 Super A与上两代Protein A填料的性能对比
特点1
更高的动态吸附载量我们对比了在不同柱留时间下Super A与市售琼脂糖Protein A填料的动态吸附载量 (DBC) 数据。可以看到柱留时间<5分钟时,Super A的DBC更高。
图1 柱留时间和动态吸附载量的关系
特点 2
优异的耐碱性能图2是Super A与其他两款市售Protein A填料的耐碱性数据对比。使用0.5 mol/L NaOH溶液进行150次CIP清洗后,Super A的DBC依然能够保持在90%以上。
图2 耐碱性能的比较(0.5 mol/L NaOH CIP)
特点 3
更温和的洗脱pH条件图3中比较了三款Protein A填料的洗脱pH。从图中可以看到Super A的出峰时间最早,且在pH 4.0左右时就能够实现洗脱IgG,有效抑制聚集体的形成。
图3 抗体的洗脱pH
特点 4
稳定的压力-流速曲线Super A采用了经过改进的填料骨架,比上一代Protein A填料的刚性更强,装填至20 cm柱高的层析柱中依然可以保持平缓的压力-流速曲线(图4)。即使在大型层析柱中使用也能获得良好的操作流速。
图4 压力-流速曲线
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