恒测智能仪表 发表于 2024-11-9 10:11:13

老式分光光度计怎么用

老式分光光度计怎么用?

dioclu 发表于 2024-11-9 11:10:19

老式分光光度计(也叫分光光度计)是一种用于测量物质吸光度(或透过率)与波长关系的仪器,广泛应用于化学分析、生物医学等领域。分光光度计的原理基于比尔定律(Beer-Lambert Law),即物质吸收的光强度与其浓度和光路长度成正比。

老式分光光度计通常由以下主要部分组成:

    光源:提供白光,通常使用氘灯、钨灯等。
    单色仪(分光器):将白光分解成不同波长的单色光。
    样品室:放置待测样品。
    光电检测器:检测透过样品的光,并转化为电信号。
    显示器/读数装置:显示吸光度或透过率的数值。

使用步骤:
1. 准备样品

    液体样品:通常将样品放在透明的比色管或光路容器中,确保容器洁净且无气泡。
    固体样品:如果是固体,可能需要研磨成粉末或溶解在适当溶剂中,才能进行测量。

2. 打开仪器

    打开分光光度计的电源,等待仪器预热和稳定。
    确保光源和单色仪已经正常工作。

3. 选择波长

    老式分光光度计上通常有一个旋钮或控制按钮用于设置波长。通过这个控制装置,选择你需要测量的波长(单位通常是纳米,nm)。
    如果不确定最佳波长,可以根据待测物质的吸收光谱选择最合适的波长。

4. 校准仪器(空白对照)

    在测量之前,需要使用“空白对照”来进行校准。空白样品是指不含待测物质的溶液,通常是溶剂本身(例如水、缓冲液等)。
    将空白样品放入比色管或样品室,确保光路没有任何障碍物。
    调整仪器,使其显示0吸光度或100%透过率,这样仪器就被“归零”了,准备测量待测样品。

5. 测量样品

    将待测样品放入样品室,确保光路通畅,样品没有气泡。
    仪器会测量透过样品的光的强度,并计算出样品的吸光度(Absorbance, A)或透过率(Transmittance, T)。
      吸光度 (A) 通常是通过仪器显示,数值越大表示样品吸光度越强,反之则越弱。
      吸光度与透过率之间有关系:

      A=−log⁡T
      A=−logT

      T=10−A
      T=10−A
      其中,TT是透过率,AA是吸光度。

6. 读取结果

    仪器会显示样品在选定波长下的吸光度值,通常显示的是一个数字,可能在显示屏上显示出来。
    对于定量分析,吸光度与样品浓度是成正比的,可以通过比尔定律进行计算:

    A=εcl
    A=εcl
    其中,AA是吸光度,εε是摩尔吸光系数(物质特性,常常通过文献查得),cc是样品浓度,ll是光程(通常为比色管的长度)。

7. 记录数据

    根据吸光度和已知的摩尔吸光系数(如果需要),可以计算样品的浓度。
    将结果记录下来,并根据需要进行分析。

yosh1222 发表于 2024-11-9 11:24:22

老式分光光度计使用步骤:开机预热、调零、设定波长、放入样品、读取吸光度值。注意清洁比色皿,避免污染。
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