lcms质谱仪原理
一、基本工作原理[*]液相色谱分离:
[*]样品通过液相色谱系统被分离成各个组分。
[*]液相色谱利用固体或液体的固定相(色谱柱)和流动相(移动液体)之间的相互作用,使混合物中的不同成分在通过色谱柱时以不同的速率移动,从而实现分离。
[*]质谱检测:
[*]分离后的组分依次进入质谱检测器。
[*]在离子源中,各组分被电离成带有一定电荷、质量数不同的离子。
[*]不同离子在电磁场中的运动行为不同,采用质量分析器按不同质荷比(m/z)把离子分开,得到依质荷比顺序排列的质谱图。
二、关键部件及功能
[*]液相色谱系统:
[*]包括进样系统、输液系统、分离系统、检测系统等组成部分。
[*]在LC-MS系统中,MS部分作为LC的检测器。
[*]接口:
[*]由于液相色谱中的流动相是液体,而质谱检测的是气体离子,所以接口技术必须解决液体离子化的难题。
[*]常用电离源有大气压电喷雾电离源(ESI)和大气压化学电离源(APCI)。
[*]离子源:
[*]将样品转化为离子。
[*]ESI的工作原理是将液滴变成蒸汽,通过高压和雾化气的作用形成扇状喷雾,使液滴生成含样品和溶剂离子的气溶胶,最终形成气相离子。
[*]APCI的离子化作用包括经典APCI、离子蒸发和摩擦电APCI等机制。
[*]质量分析器:
[*]将离子按质荷比分开的部分。
[*]常见的质量分析器有单聚焦质量分析器、双聚焦质量分析器、四极杆滤质器、离子阱和飞行时间质量分析器等。
[*]检测器:
[*]用于接收离子束的装置,如电子倍增器、光电倍增器、微通道板等。
[*]真空系统:
[*]质谱仪的离子源、质量分析器和检测器必须在高真空状态下工作,以减少本底的干扰,避免发生不必要的离子-分子反应。
三、质谱图分析
[*]质荷比(m/z):
[*]质谱中使用的主要参数,表示离子的质量与电荷的比率。
[*]质荷比是质谱图的横坐标,是质谱定性分析的基础。
[*]离子丰度:
[*]检测器检测到的离子信号强度。
[*]离子相对丰度是以质谱图中指定质荷比范围内最强峰为100%,其它离子峰对其归一化所得的强度。标准质谱图均以离子相对丰度值为纵坐标。
[*]质谱图解析:
[*]通过对质谱图的分析处理,可以得到样品的定性和定量结果。
[*]如根据质谱图中的峰位置(质荷比)和峰强度(离子丰度)来确定样品的组成和含量。
四、应用与特点
[*]应用:
[*]LC-MS广泛应用于化学、生物和药物研究等领域。
[*]如药物代谢产物的分析、蛋白质组学研究、环境监测中的痕量分析等。
[*]特点:
[*]高灵敏度:能够测试到非常低浓度的成分。
[*]高分辨率:可以分辨出非常接近的分子。
[*]定性和定量:提供关于分子质量、结构信息,并能够进行定量分析。
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