威高力仪器仪表 发表于 2025-2-14 11:27:38

紫外光度计空白管调零步骤

紫外光度计的空白管调零(基线校正)是确保测量准确性的关键步骤,其目的是消除溶剂、比色皿和其他背景因素对吸光度的影响。以下是详细操作步骤及注意事项:操作步骤
[*]准备空白溶液

[*]空白液需与待测样品的溶剂完全一致(如水、缓冲液、乙醇等)。
[*]确保空白液澄清透明,无杂质或气泡(必要时可过滤或离心)。
[*]仪器预热
[*]打开紫外光度计电源,预热仪器至稳定状态(通常需15-30分钟,具体时间参考说明书)。
[*]预热可减少光源波动和检测器噪声对测量的影响。

[*]设置测量波长
[*]将仪器波长调节至实验所需波长(如测定DNA时设为260 nm)。
[*]若需多波长测量,每次更换波长后需重新调零。

[*]校正比色皿配对性(可选)
[*]对于高精度测量,建议使用同一批次的比色皿。
[*]装入空白液至所有比色皿,测量吸光度差异,选择匹配度高的比色皿。

[*]装入空白液
[*]将空白液倒入比色皿至约3/4高度,避免溢出。
[*]用擦镜纸或无尘布清洁比色皿透光面,确保无指纹、水渍或划痕。
[*]正确放置比色皿:标记面朝向光路方向(通常为仪器标示的箭头侧)。

[*]调零(基线校正)
[*]将空白比色皿放入样品室,关闭盖子(避免杂散光干扰)。
[*]按下仪器面板的 “Zero” 或 “Auto Zero” 键,仪器自动将当前吸光度归零。
[*]部分仪器需先选择“空白校正”模式再按确认键,具体操作参考说明书。

[*]验证调零效果
[*]取出空白比色皿,重新放入并测量吸光度,正常值应在 0.000 ± 0.002 范围内。
[*]若偏差较大,需检查:
[*]比色皿是否清洁或损坏;
[*]空白液是否与样品溶剂一致;
[*]仪器光路是否被遮挡或有异物。


注意事项
[*]比色皿使用规范:

[*]手持比色皿时避免接触透光面,建议戴手套操作。
[*]不同溶剂使用专用比色皿(如石英比色皿用于紫外区,玻璃比色皿仅用于可见光区)。
[*]环境控制:
[*]避免强光直射仪器,防止环境温度剧烈波动。

[*]异常处理:
[*]若调零后吸光度漂移,可能是光源老化或检测器故障,需联系维修。

常见问题解决
[*]调零后读数不稳定:检查比色皿是否完全干燥,或重新注入空白液排除气泡影响。
[*]吸光度无法归零:确认波长设置正确,或更换空白液(如溶剂挥发导致浓度变化)。
[*]仪器显示错误代码:参考说明书排查原因,常见问题包括光闸未开或比色皿未放入到位。
通过规范操作和定期维护(如清洁样品室、校准波长),可确保紫外光度计的测量精度和长期稳定性。

我头在否 发表于 2025-3-24 21:46:28

每次看到您的帖子都能学到不少东西,真的很不错。

蹭吃蹭喝 发表于 2025-3-25 20:05:35

您的帖子让我意识到自己在操作上的不足,会更加注意。
页: [1]
查看完整版本: 紫外光度计空白管调零步骤