紫外光度计空白管调零步骤

威高力仪器仪表

紫外光度计的空白管调零（基线校正）是确保测量准确性的关键步骤，其目的是消除溶剂、比色皿和其他背景因素对吸光度的影响。以下是详细操作步骤及注意事项：

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操作步骤

• 准备空白溶液
  
  
  • 空白液需与待测样品的溶剂完全一致（如水、缓冲液、乙醇等）。
  • 确保空白液澄清透明，无杂质或气泡（必要时可过滤或离心）。
    
    
• 仪器预热
  • 打开紫外光度计电源，预热仪器至稳定状态（通常需15-30分钟，具体时间参考说明书）。
  • 预热可减少光源波动和检测器噪声对测量的影响。
    
    
• 设置测量波长
  • 将仪器波长调节至实验所需波长（如测定DNA时设为260 nm）。
  • 若需多波长测量，每次更换波长后需重新调零。
    
    
• 校正比色皿配对性（可选）
  • 对于高精度测量，建议使用同一批次的比色皿。
  • 装入空白液至所有比色皿，测量吸光度差异，选择匹配度高的比色皿。
    
    
• 装入空白液
  • 将空白液倒入比色皿至约3/4高度，避免溢出。
  • 用擦镜纸或无尘布清洁比色皿透光面，确保无指纹、水渍或划痕。
  • 正确放置比色皿：标记面朝向光路方向（通常为仪器标示的箭头侧）。
    
    
• 调零（基线校正）
  • 将空白比色皿放入样品室，关闭盖子（避免杂散光干扰）。
  • 按下仪器面板的 “Zero” 或 “Auto Zero” 键，仪器自动将当前吸光度归零。
  • 部分仪器需先选择“空白校正”模式再按确认键，具体操作参考说明书。
    
    
• 验证调零效果
  • 取出空白比色皿，重新放入并测量吸光度，正常值应在 0.000 ± 0.002 范围内。
  • 若偏差较大，需检查：
    • 比色皿是否清洁或损坏；
    • 空白液是否与样品溶剂一致；
    • 仪器光路是否被遮挡或有异物。
      
      
    
    
  
  

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注意事项

• 比色皿使用规范：
  
  
  • 手持比色皿时避免接触透光面，建议戴手套操作。
  • 不同溶剂使用专用比色皿（如石英比色皿用于紫外区，玻璃比色皿仅用于可见光区）。
    
    
• 环境控制：
  • 避免强光直射仪器，防止环境温度剧烈波动。
    
    
• 异常处理：
  • 若调零后吸光度漂移，可能是光源老化或检测器故障，需联系维修。
    
    
  
  

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常见问题解决

• 调零后读数不稳定：检查比色皿是否完全干燥，或重新注入空白液排除气泡影响。
• 吸光度无法归零：确认波长设置正确，或更换空白液（如溶剂挥发导致浓度变化）。
• 仪器显示错误代码：参考说明书排查原因，常见问题包括光闸未开或比色皿未放入到位。
  
  

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通过规范操作和定期维护（如清洁样品室、校准波长），可确保紫外光度计的测量精度和长期稳定性。