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电子显微镜的使用方法
电子显微镜(Electron Microscope, EM)是一种利用电子束而非可见光来形成图像的显微设备,能够实现比光学显微镜更高的分辨率。根据其工作原理的不同,电子显微镜主要有两种类型:透射电子显微镜(Transmission Electron Microscope, TEM)和扫描电子显微镜(Scanning Electron Microscope, SEM)。下面是这两种显微镜的基本使用步骤概述:
透射电子显微镜 (TEM)
样本制备:
样本必须非常薄(通常小于100纳米),以允许电子束穿过。
对生物样本进行固定、脱水、浸透树脂后进行超薄切片。
非生物样本可能需要通过研磨或其他方法减薄。
样本加载:
使用特制的网格(通常由碳或金属制成)将样本固定住。
将样本网格放置在TEM样品架上,并插入显微镜。
设置参数:
调整电子枪的能量和强度。
设定合适的放大倍数。
调节光阑孔径以获得最佳图像质量。
观察与记录:
观察样本并通过CCD相机或传统胶片记录图像。
扫描电子显微镜 (SEM)
样本制备:
样本无需像TEM那样极薄,但表面必须干燥且不含挥发性物质。
如果样本导电性差,则需要镀一层金属(如金或铂)来改善导电性。
样本加载:
将样本固定在样品台上。
将样品台放入SEM的真空腔室内。
设置参数:
调整电子束的加速电压。
设定扫描模式(如二次电子像或背散射电子像)。
选择合适的放大倍数和工作距离。
观察与记录:
通过显示器观察样本表面的详细结构。
使用内置的数字相机保存图像数据。
注意事项
在使用任何类型的电子显微镜之前,确保了解安全规程,特别是在处理有害化学品和维护真空环境时。
电子显微镜的操作通常需要专门训练,初次使用者应在有经验的技术人员指导下进行。
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