细胞计数板如何计数？

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　　细胞计数是生物学和医学研究中的基本技术，用于确定样品中活细胞的数量。细胞计数板（也称为血球计数板或Hemocytometer）是一种常用的工具，通过显微镜下观察特定区域内的细胞数量来推算整个样本中的细胞总数。以下是如何使用细胞计数板进行细胞计数的步骤：
　　1.准备工作
　　清洁与消毒：首先确保细胞计数板、吸管、盖玻片等器具干净无污染。
　　制备样品：将待测细胞悬液稀释到适当浓度，通常为了便于计数，浓度应在每毫升几百至几千个细胞之间。
　　2.加样
　　使用微量移液器或滴管，小心地在细胞计数板的一个或多个小格上加入一定体积的细胞悬液，然后用盖玻片轻轻覆盖，避免产生气泡。
　　3.计数
　　将细胞计数板置于显微镜下的载物台上，并调整显微镜至合适的放大倍数，一般为400x或1000x。
　　观察细胞计数板上的网格，每个大格子内有更细的小格子，选择其中的几个单元格进行计数（例如，四个角的大格和中央大格），记录每个小格内的细胞数目。
　　4.数据处理
　　根据所选小格的数量和体积，计算平均值。
　　使用公式计算总体积内的细胞数量。例如，如果一个大格表示的是0.1mm³的体积，而你在四个大格中共计数了N个细胞，则总体积V(单位为ml)内的细胞数量=N/(大格数*小格体积)*总体积分母*稀释倍数。
　　5.检查活力（可选）
　　如果需要检查细胞活力，可以采用染色法，如台盼蓝排除法，将死细胞染色后，只计数未被染色的活细胞。
　　注意事项：
　　在操作过程中要尽量减少样品暴露于空气中的时间，以防干燥影响细胞状态。
　　避免强力挤压盖玻片导致细胞破坏。
　　确保每次实验前对计数板进行彻底清洗和干燥，以免残留物质干扰结果。
　　正确使用细胞计数板不仅可以得到准确的细胞计数数据，而且对于后续实验的设计和分析具有重要指导意义。