分选活细胞流式细胞仪

仪界精英

　　分选活细胞流式细胞仪，即流式细胞分选仪或荧光激活细胞分选仪，是一种高度专业化的科学仪器，用于对液流中的单列排列的活细胞进行高速、精确的定量分析和分选。以下是对该仪器的详细介绍：
　　一、工作原理
　　流式细胞分选仪的工作原理基于流式细胞术，该技术融合了流体力学、激光技术、电子物理、光电测量、计算机科学、荧光化学以及单克隆抗体等多学科领域的技术。其工作流程大致如下：
　　待测细胞经过染色处理，标记上特定的荧光素，然后制成单细胞悬液。
　　通过一定的压力，将待测样品压入流动室。同时，不含细胞的磷酸缓冲液在高压下从鞘液管喷出，与待测样品流形成一定的角度，使鞘液有效地包绕着样品高速流动，形成一个圆形的流束。在鞘液的包裹下，待测细胞以单行的形式依次通过检测区域。
　　流式细胞分选仪的核心部件是激光器，它发出的光束经过聚焦整形后，垂直照射在样品流上。荧光染色的细胞在激光的激发下，会产生散射光和激发荧光。
　　散射光和激发荧光分别被特定的光电检测器接收，并转化为电信号。这些信号随后被计算机分析处理，以得出细胞的各项参数。
　　根据预设的参数，计算机控制细胞的分选过程。在流动室的喷口处，配置了一个超高频电晶体，该电晶体在充电后会产生振动，使得喷出的液流断裂成均匀的液滴，其中包含的待测定细胞便分散于这些液滴之中。通过给这些液滴施加正负不同的电荷，当液滴流经带有几千伏特的偏转板时，在高压电场的作用下发生偏转，并落入相应的收集容器中，从而实现细胞的精准分离。
　　二、应用领域
　　流式细胞分选仪在多个学科领域中有着广泛的应用，包括但不限于：
　　细胞生物学：用于测定细胞周期各时相细胞的百分比，以及细胞群体中每个细胞的DNA含量等。
　　免疫学：用于鉴别死细胞和活细胞，定量测定细胞表面和内部的受体等，对深入了解免疫系统的功能和机制具有重要意义。
　　遗传学：通过测定染色体DNA含量，可以得到染色体频率分布图，称为流式染色体核型分析。这种技术不仅能快速分析核型，还能分选出不同类型的染色体，为人类基因组研究、遗传病和癌症的诊断提供了有力的支持。
　　肿瘤学：由于肿瘤细胞常常含有异常数量的DNA，流式细胞术能够快速且精确地测定DNA倍性，为肿瘤诊断提供有价值的数据。
　　此外，流式细胞分选仪还被广泛应用于药理学、血液学、微生物学和分子生物学等领域。
　　三、注意事项
　　在使用流式细胞分选仪时，需要注意以下几点：
　　仪器应放置在稳定、干燥、无尘的环境中，避免阳光直射和强烈震动。
　　操作前应对仪器进行预热和校准，确保测量结果的准确性。
　　使用过程中应严格按照操作规程进行，避免操作失误导致仪器损坏或测量结果不准确。
　　定期对仪器进行维护和保养，包括清洁光学元件、检查激光器工作状态等。
　　综上所述，分选活细胞流式细胞仪是一种功能强大、操作简便的科学仪器，在多个学科领域中有着广泛的应用。选择适合自己的品牌和型号，并严格按照操作规程进行使用和维护，可以充分发挥其优势，为科研和临床提供有力的支持。