流式细胞仪的原理

仪表探索者

　　流式细胞仪是以激光为光源，检测生物学颗粒理化性质的仪器，其基本原理主要包括流体动力学聚焦原理、激光激发原理和荧光检测原理，以下是对这些原理的详细解释：
　　一、流体动力学聚焦原理
　　细胞样本需制成单细胞悬液。在流式细胞仪的流动室中，细胞被鞘液包围。通过精确控制鞘液和样本流的流速与压力，细胞在鞘液的裹挟下会呈单列依次通过检测区域。这一过程确保了每个细胞能被单独检测，避免了细胞之间的重叠或干扰，从而提高了检测的准确性和灵敏度。
　　二、激光激发原理
　　当细胞逐个通过检测区时，激光束会照射到细胞上。若细胞中的成分被荧光染料标记，这些成分就会吸收激光能量并发出荧光。不同荧光染料因化学结构差异而具有不同的激发和发射波长。特定染料与细胞内核酸结合后，在激光照射下会产生独特荧光，这些荧光信号可用于后续的检测和分析。
　　三、荧光检测原理
　　被激发的荧光信号由光学系统收集，并通过滤光片筛选特定波长的荧光。随后，光电探测器将这些荧光信号转变成电信号，电信号的强度与荧光强度成正比。通过分析这些电信号，可以获得关于细胞大小（依据前向散射光，细胞越大则前向散射光越强）、内部复杂程度（依据侧向散射光）以及荧光标记所代表的生物学特性（如细胞表面抗原表达、细胞内蛋白含量、DNA含量等）的信息。
　　综上所述，流式细胞仪通过结合流体动力学聚焦、激光激发和荧光检测等原理，能够实现对细胞的快速、准确和灵敏的检测和分析。这些原理的协同作用使得流式细胞仪在生物医学研究、临床诊断等领域具有广泛的应用价值。