凝胶渗透色谱仪的使用方法

潮光阁

使用凝胶渗透色谱仪的基本步骤和操作流程如下：
1、准备工作
样品准备
选择合适溶剂：根据样品的特性和分析需求，选择合适的溶剂作为流动相。常见的流动相有四氢呋喃、N,N-二甲基甲酰胺、二甲基亚砜等有机溶剂，对于水溶性聚合物可选用水相或水与有机溶剂的混合液。确保溶剂的纯度和质量，避免含有杂质影响测试结果。
样品溶解：将适量的样品溶解在选定的溶剂中，制成浓度适宜的溶液。一般来说，样品浓度在2-5毫克/毫升之间较为合适，具体浓度可根据样品的实际情况和仪器的灵敏度进行调整。对于不易溶解的样品，可以采取加热、搅拌等方法促进溶解，但要注意避免样品发生分解或降解。
过滤样品：使用合适的滤膜对样品溶液进行过滤，以去除其中的不溶性杂质和颗粒，防止其堵塞色谱柱。对于有机相样品，通常使用0.45微米的滤膜；对于水相样品，则使用0.22微米的滤膜。
仪器准备
开机预热：打开凝胶渗透色谱仪的电源开关，启动仪器，让仪器预热一段时间，一般至少需要30分钟到1小时，以确保仪器的稳定性和各部件达到正常工作温度。
检查系统连接：检查仪器的各个部件之间的连接是否牢固，包括泵、进样器、色谱柱、检测器和数据采集系统等，确保没有漏液现象。同时，检查流动相的供应是否正常，废液排放是否通畅。
清洗系统：用流动相冲洗整个系统，排除管路和色谱柱中的空气和杂质，直到检测器的基线平稳，无异常峰出现。
2、参数设置
设定流动相流速：根据色谱柱的要求和分析需求，设置合适的流动相流速。较高的流速可以缩短分析时间，但可能会降低分离效果；较低的流速则可以提高分离效果，但分析时间会延长。一般来说，流速控制在0.1-1毫升/分钟之间。
设置柱温：根据样品的性质和分析要求，设置色谱柱的温度。柱温的变化会影响样品在色谱柱中的分离效果和保留时间，因此需要保持柱温的稳定。有些仪器配备了柱温控制系统，可以在常温至高温范围内进行精确控制。
选择检测器参数：根据所使用的检测器类型（如示差折光检测器、紫外检测器等），设置相应的检测器参数，如检测波长、灵敏度等，以获得最佳的检测信号。
3、样品测定
进样：使用进样器将过滤后的样品溶液注入到色谱柱中。进样量要适中，一般为几十微升到几百微升不等，具体进样量可根据样品的浓度和色谱柱的规格进行调整。注意进样时要快速、准确，避免产生气泡或漏液现象。
开始采集数据：启动数据采集系统，记录样品在色谱柱中的分离过程和检测信号。在样品通过色谱柱的过程中，不同分子量的高分子化合物会按照分子大小的顺序依次从色谱柱中流出，检测器会根据样品的浓度变化产生相应的信号，形成色谱图。
结束测定：当样品完全通过色谱柱，且检测信号回到基线后，停止数据采集，完成一次样品的测定。
4、数据处理与分析
分子量校正：使用已知分子量的高分子标准物质制作标准曲线，通过对标准物质的测定，建立分子量与保留时间或淋出体积之间的关系。然后根据样品的保留时间和标准曲线，计算出样品中高分子化合物的分子量分布。
数据分析：对采集到的色谱图进行处理和分析，可以得到样品的分子量分布曲线、平均分子量、分子量分散度等信息。还可以根据需要进行进一步的数据处理和统计分析，如比较不同样品之间的差异、研究分子结构与性能的关系等。

奶油小熊

赞同楼上，这个观点很有价值。