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如何使用培养箱进行细胞培养?

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发表于 2025-3-5 13:22:05 | 显示全部楼层 |阅读模式
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 楼主| 发表于 2025-3-5 13:23:14 | 显示全部楼层

使用培养箱进行细胞培养的基本步骤:

1. 准备培养基和试剂
选择适合你所培养的细胞类型的培养基。不同类型的细胞需要不同的培养基成分(如基础培养基、血清、抗生素等)。
制备所需的试剂和化学品,确保它们在适当的条件下保存。

2. 准备培养容器
根据需要选择适合的培养容器,如培养瓶、培养皿或培养管。
有些细胞类型需要经过处理(如涂布基质)以帮助细胞附着。

3. 接种细胞
在无菌操作台(如生物安全柜)内,使用无菌操作技术将细胞接种到培养容器中。
控制接种的细胞密度,根据细胞的种类和培养条件不同,接种的细胞密度会有所不同。

4. 调整培养箱的条件
温度设置:大多数哺乳动物细胞需要在37°C的温度下培养。
二氧化碳浓度:培养箱内的二氧化碳浓度一般设定为5%,以维持培养基的pH值稳定。
湿度控制:培养箱中的湿度应保持在95%以上,以避免培养基蒸发。
这些条件通常可以在培养箱的控制面板上进行调整。

5. 细胞培养
将接种好的细胞培养容器放入培养箱中,并定期检查细胞的生长状态。
细胞培养过程中,可以定期更换培养基(通常每2-3天),以提供新鲜的营养和去除废物。

6. 观察细胞生长情况
细胞培养过程中可以通过显微镜定期观察细胞的形态、密度、附着情况等。
细胞生长的速度和形态变化可用来评估培养条件是否合适。

7. 处理细胞(传代、冻存等)
当细胞生长到适当的密度时,可能需要进行传代(分瓶)或冻存。
传代时,通过胰蛋白酶消化或其他方法将细胞从培养底面分离,随后重新接种到新的培养容器中。
冻存时,细胞会被冻存液保存,并在低温下保存,以备后续使用。
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