凝胶电泳仪工作原理分析

志源仪器

凝胶电泳仪是一种用于分离和检测生物大分子（如DNA、RNA或蛋白质）的仪器，其基本原理基于电场作用下带电分子在凝胶基质中的迁移。以下是凝胶电泳仪的基本原理和关键步骤的详细说明：  
​1.电场作用  
​原理：凝胶电泳仪通过施加电场，使带电分子在凝胶基质中迁移。分子迁移的方向和速度取决于其电荷性质和分子大小。  
​电荷性质：在电场中，带负电的分子向正极迁移，带正电的分子向负极迁移。  
​分子大小：较小的分子迁移速度较快，较大的分子迁移速度较慢。  
​2.凝胶基质  
​凝胶类型：  
​琼脂糖凝胶：常用于DNA和RNA电泳，孔径较大，适合分离大分子。  
​聚丙烯酰胺凝胶（PAGE）​：常用于蛋白质电泳，孔径较小，适合分离小分子。  
​作用：凝胶基质形成网状结构，起到分子筛的作用，根据分子大小实现分离。  
​3.样品加载  
​加样孔：在凝胶上制备加样孔，将样品加载到孔中。  
​样品准备：样品通常与染料和缓冲液混合，以增加可见性和导电性。  
​4.电泳缓冲液  
​作用：提供离子环境，维持电场稳定，并帮助分子迁移。  
​常用缓冲液：  
​DNA电泳：TAE（Tris-乙酸-EDTA）或TBE（Tris-硼酸-EDTA）缓冲液。  
​蛋白质电泳：Tris-Glycine或SDS-PAGE缓冲液。  
​5.电泳过程  
​电压和时间：根据实验目的和样品性质设置电压和时间。  
DNA电泳：通常为5-10V/cm，时间30-60分钟。  
蛋白质电泳：通常为100-200V，时间1-2小时。  
​迁移分离：在电场作用下，带电分子在凝胶中迁移，根据大小和电荷差异实现分离。  
​6.染色和检测  
​染色：电泳结束后，对凝胶进行染色以显示分离的条带。  
DNA和RNA：常用溴化乙锭（EB）或SYBRGreen染色。  
蛋白质：常用考马斯亮蓝或银染。  
​检测：使用紫外灯或成像系统观察和记录条带。

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