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老式分光光度计（也叫分光光度计）是一种用于测量物质吸光度（或透过率）与波长关系的仪器，广泛应用于化学分析、生物医学等领域。分光光度计的原理基于比尔定律（Beer-Lambert Law），即物质吸收的光强度与其浓度和光路长度成正比。
老式分光光度计通常由以下主要部分组成：
光源：提供白光，通常使用氘灯、钨灯等。
单色仪（分光器）：将白光分解成不同波长的单色光。
样品室：放置待测样品。
光电检测器：检测透过样品的光，并转化为电信号。
显示器/读数装置：显示吸光度或透过率的数值。
使用步骤：
1. 准备样品
液体样品：通常将样品放在透明的比色管或光路容器中，确保容器洁净且无气泡。
固体样品：如果是固体，可能需要研磨成粉末或溶解在适当溶剂中，才能进行测量。
2. 打开仪器
打开分光光度计的电源，等待仪器预热和稳定。
确保光源和单色仪已经正常工作。
3. 选择波长
老式分光光度计上通常有一个旋钮或控制按钮用于设置波长。通过这个控制装置，选择你需要测量的波长（单位通常是纳米，nm）。
如果不确定最佳波长，可以根据待测物质的吸收光谱选择最合适的波长。
4. 校准仪器（空白对照）
在测量之前，需要使用“空白对照”来进行校准。空白样品是指不含待测物质的溶液，通常是溶剂本身（例如水、缓冲液等）。
将空白样品放入比色管或样品室，确保光路没有任何障碍物。
调整仪器，使其显示0吸光度或100%透过率，这样仪器就被“归零”了，准备测量待测样品。
5. 测量样品
将待测样品放入样品室，确保光路通畅，样品没有气泡。
仪器会测量透过样品的光的强度，并计算出样品的吸光度（Absorbance, A）或透过率（Transmittance, T）。
吸光度 (A) 通常是通过仪器显示，数值越大表示样品吸光度越强，反之则越弱。
吸光度与透过率之间有关系：
A=−logT
A=−logT
T=10−A
T=10−A
其中，TT是透过率，AA是吸光度。
6. 读取结果
仪器会显示样品在选定波长下的吸光度值，通常显示的是一个数字，可能在显示屏上显示出来。
对于定量分析，吸光度与样品浓度是成正比的，可以通过比尔定律进行计算：
A=εcl
A=εcl
其中，AA是吸光度，εε是摩尔吸光系数（物质特性，常常通过文献查得），cc是样品浓度，ll是光程（通常为比色管的长度）。
7. 记录数据
根据吸光度和已知的摩尔吸光系数（如果需要），可以计算样品的浓度。
将结果记录下来，并根据需要进行分析。
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